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10种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌生物学性状的影响

发布日期:2014-05-09 14:24:39  来源:本站整理  将本页收藏至:QQ书签 百度收藏

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10种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌生物学性状的影响

                     10种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌生物学性状的影响
                                   叶小真1,陈全助2,3,宋漳3
    (1.福建农林大学金山学院,福建福州350002;2.三明市林业局,福建三明365000;3.福建农林大学林学院,福建福州350002)
    摘要:研究了10种杀虫剂对金龟子绿僵菌生物学性状的影响。结果表明,杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发、菌落生长及产孢均有不同程度的影响,且抑制作用随着杀虫剂浓度的下降而减弱。阿维菌素对大部分菌株分生孢子萌发的抑制作用较小。阿维·灭幼脲、灭多威和辛硫磷对菌落生长的抑制作用较小,在低浓度水平上有出现负抑制率,说明低浓度的该3种杀虫剂有促进金龟子绿僵菌菌落生长的可能。辛硫磷对显著抑制多数菌株产孢,而某些低浓度杀虫剂(如联苯菊酯、敌百虫、灭多威、阿维菌素和虫酰肼)对金龟子绿僵菌产孢有负的抑制作用。另外,不同菌株对同一种杀虫剂的敏感度也不一样。Ma208菌株分生孢子对多数杀虫剂较敏感,但对氯氰菊酯较不敏感。Ma336菌株菌落生长受杀虫剂的影响较大,其他菌株受影响较小。Ma202、Ma103菌株的产孢量受杀虫剂的影响较大,而其他菌株受影响程度较低。
    关键词:金龟子绿僵菌;化学杀虫剂;生物学性状;抑制作用
    中图分类号:S476.12文献标识码:A文章编号:1001-389X(2012)02-0169-05
    金龟子绿僵菌[Metarhizium anisopliae(Metsch.)Sorokin]是一种重要的虫生真菌,被广泛应用于害虫的微生物防治[1-3]。一般认为,生防真菌与低剂量的化学杀虫剂混用,可以克服双方的缺点,同时提高害虫的防治效果。20世纪60年代,人们就开始了菌药混用的研究[4-7]。在前苏联和东欧,人们将球孢白僵菌制剂与亚致死剂量的敌百虫混配用于防治马铃薯甲虫等,其效果十分明显。我国在这方面的研究也取得了一定成就。李增智等[8]研究了12种杀虫剂对球孢白僵菌、粉拟青霉、绿僵菌3种虫生真菌菌株的抑制作用,发现绝大多数杀虫剂对真菌有抑制作用,认为灭幼脲对球孢白僵菌有很好的相容性。宋漳[9]的研究结果表明6种杀虫剂对绿僵菌分生孢子有不同程度的抑制作用,浓度愈高,抑制作用愈强。贾春生等[10]利用绿僵菌与倍硫磷混用进行防治东北大黑鳃金龟(Holotrichia diomphalia)1龄幼虫的试验,结果表明,该方法具有明显的增效作用。蔡国贵[11]通过应用白僵菌、溴氰菊酯粉及白僵菌与0.105%和0.107 5%溴氰菊酯混合粉,对刚竹毒蛾(Pantana phyllostachysae Chao)进行了室内外防治试验,研究结果表明菌药混合使用具有增效作用。袁盛勇[12]通过室内测定球孢白僵菌MZ041016菌株不同浓度孢子及与不同农药混配对甘蓝蚜(Brevicoryne brassicae L)的毒力,结果显示,该菌株分生孢子液与乐斯本等4种化学农药的混配液对甘蓝蚜的致死率不同,稀释10倍的防治效果比稀释100倍好,其中,乐斯本的效果最好。许寿涛等[13]用球孢白僵菌孢子与10种常用农药相容性的测定结果显示,随着孢子浓度上升,农药对孢子的抑制均有不同程度的增强。刘淑娟[14]在研究枯草芽孢杆菌与化学农药混配防治孜然根腐病时发现,扑海因和甲基托布津在适宜浓度下可显著提高枯草芽孢杆菌的防治效果。李敏等[15]研究表明哈茨木霉与多菌灵复合使用对防治水稻立枯病具有显著的增效作用,而这种显著增加是杀菌剂体外杀菌作用、生防菌株体外拮抗作用及植物系统获得的抗性增强等多方面的结果。笔者在前期研究基础上[16]选用10种化学杀虫剂,就其对金龟子绿僵菌12个菌株生物学性状的影响进行研究,从而为菌药混配生产与应用提供参考依据。
    1·材料与方法
    1.1供试菌种与菌种培养
    供试菌种:Ma103,Ma336,Ma337,Ma201,Ma202,Ma203,Ma204,Ma205,Ma206,Ma207,Ma208,Ma209(全部为金龟子绿僵菌);以上菌株均来源于福建农林大学林学院森林保护学实验室。将供试各菌种分别接种于PPDA培养基并置于25℃的恒温箱中培养10 d,待各菌株充分产孢后置于冰箱中备用。孢子萌发培养液配方:5 g蛋白胨、20 g蔗糖、1 mL吐温-80、蒸馏水加至1 000 mL。
    1.2供试杀虫剂
    选用10种常用杀虫剂,其中4种有机磷农药:辛硫磷,马拉硫磷,敌百虫,乐斯本;2种拟除虫菊酯:氯氰菊酯,联苯菊酯;2种生长调节剂:阿维·灭幼脲,虫酰肼;1种氨基甲酸酯:灭多威(万灵);1种抗生素类:阿维菌素。将供试药剂配制成表1所示的5个浓度,其中A、B、C、D、E浓度分别是各农药田间推荐使用浓度最低浓度的5、10、20、40、60倍稀释液。
    1.3化学杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的影响
    用0.1%吐温-80无菌水将培养基上的孢子洗出并兑成高浓度的孢子悬浮液,用孢子萌发培养液将孢子浓度稀释至106个·mL-1。培养液事先加入表1中所列农药,然后,将含药的孢子悬浮液滴在双孔凹面载玻片上,并置于有保湿条件的饭盒里,在25℃恒温培养箱中培养,48 h后在显微镜下观察,计算分生孢子萌发抑制率。每处理重复3次,以不加农药的孢子悬浮液作为对照。

    1.4化学杀虫剂对金龟子绿僵菌菌落生长的影响
    在PPDA培养基中准确加入表1所列的农药,磁力振荡均匀后,倒入直径9 cm的培养皿中,制成平板。用8 mm打孔器从平面培养基上的金龟子绿僵菌接种至培养皿中央,于25℃培养箱中培养,每日观察其生长状况,采用十字交叉法测量菌落直径,求出药剂对金龟子绿僵菌菌落生长抑制率。每处理重复3次,以不加药为对照。

    1.5化学杀虫剂对金龟子绿僵菌产孢量的影响
    用PPDA培养基配制杀虫剂,使其含有表1所列的杀虫剂。用平板混菌法将1 mL金龟子绿僵菌分生孢子悬浮液(含孢量为106个·mL-1)接种至各处理的培养基中,小心摇晃培养皿,使分生孢子均匀分布在培养基上,后置25℃下的恒温箱中培养。12 d后用0.1%的吐温-80无菌水将培养皿上的孢子洗下来,并稀释到一定倍数,在血球计数板上测定各处理的产孢量。试验设3个重复,以不加药为对照。

    2·结果与分析
    2.1化学杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发的影响
    表2表明,10种杀虫剂对12个金龟子绿僵菌菌株分生孢子萌发都有抑制作用。不同浓度水平上总体表现为随着杀虫剂浓度降低,抑制率也降低。其中阿维菌素对大部分菌株的抑制作用较小,仅对Ma337菌株存在较大的抑制作用。联苯菊酯对Ma208菌株平均抑制率达62.68%,但对Ma201和Ma202菌株抑制率最小,分别为8.36%,8.20%。辛硫磷对各菌株的抑制作用处于中等水平。而虫酰肼和灭多威对各菌株的抑制作用都较强,两者的平均抑制率分布在20%-60%之间。另外,金龟子绿僵菌同一菌株对不同杀虫剂的敏感度亦有较大差异,其中Ma208菌株对多数杀虫剂较敏感,但对氯氰菊酯较不敏感。

    2.2化学杀虫剂对金龟子绿僵菌菌落的影响
    从表3可知,10种杀虫剂对金龟子绿僵菌各菌株菌落生长均有抑制作用,且一般杀虫剂浓度越小,抑制率越小,在E浓度水平上,有些杀虫剂抑制率为负值,如低浓度的辛硫磷和阿维·灭幼脲对大部分菌株抑制率为负值。阿维·灭幼脲、辛硫磷及灭多威对各菌株的平均抑制率都较小。敌百虫和阿维菌素对各菌株的抑制作用较大,均高于10%。Ma336菌株菌落生长受10种杀虫剂的抑制作用较大,受影响较小的菌株各不相同,其中Ma202菌株受大部分杀虫剂的影响较小,如联苯菊酯、氯氰菊酯、辛硫磷、阿维·灭幼脲和马拉硫磷等。
    2.3化学杀虫剂对金龟子绿僵菌产孢量的影响
    10种杀虫剂对各菌株的产孢量均有不同程度的影响,且高浓度的药剂普遍抑制产孢,而低浓度的杀虫剂对产孢抑制作用较小,甚至有负的抑制率,如联苯菊酯、敌百虫、灭多威、阿维菌素和虫酰肼。从表4可以看出,辛硫磷显著抑制大部分菌株产孢,对Ma205、Ma103和Ma202三个菌株的平均抑制率分别为65.96%,52.80%和51.13%。氯氰菊酯对各菌株的抑制作用也较强。而敌百虫和联苯菊酯对多数菌株抑制作用较弱。不同菌株的产孢对化学杀虫剂敏感度存在较大的差别,Ma103、Ma202菌株的产孢量受化学杀虫剂的影响较大。

    3·小结与讨论试验结果表明,10种化学杀虫剂对金龟子绿僵菌均有影响,且抑制作用随着杀虫剂浓度的下降而减弱。不同杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发、菌落生长及产孢的抑制作用各不相同。其中阿维菌素对大部分菌株分生孢子萌发的抑制作用较小,仅对少数几个菌株存在较大的影响,而其他杀虫剂对各菌株的抑制作用相对较强。阿维·灭幼脲、灭多威和辛硫磷对金龟子绿僵菌菌落生长的抑制作用较小,在低浓度水平上对金龟子绿僵菌菌落生长有出现负的抑制率的现象,说明低浓度的该3种杀虫剂可能促进金龟子绿僵菌菌落生长。而敌百虫和阿维菌素对大部分菌株菌落生长的抑制率较大。杀虫剂对金龟子绿僵菌产孢的抑制作用各不相同,在低浓度水平时,多数杀虫剂对产孢有负的抑制作用,如联苯菊酯、敌百虫、灭多威、阿维菌素和虫酰肼,表明低浓度水平的杀虫剂有可能促进金龟子绿僵菌产孢。辛硫磷对金龟子绿僵菌产孢的抑制作用较大,除Ma207菌株外。另外,金龟子绿僵菌同一菌株对不同杀虫剂的敏感度也不一样。其中Ma208菌株分生孢子对多数杀虫剂较敏感,但对氯氰菊酯较不敏感。Ma336菌株菌落生长受杀虫剂的影响较大,其他菌株菌落生长受影响较小。Ma202、Ma103菌株的产孢量受杀虫剂的影响较大,其他菌株受影响程度较低。
    菌药混用可以结合双方的优点,一方面可以解决杀虫剂杀虫速率缓慢的问题,另一方面还可以很大程度上减少污染,缓解害虫对农药产生抗药性问题。即化学农药在一定程度上降低了杀虫微生物的孢子萌发率,抑制了菌落生长及产孢,但同时也降低了害虫的免疫力,使之更容易被微生物侵染。故菌药混合的防治效果往往较明显。由于不同种类及不同浓度的杀虫剂对金龟子绿僵菌同一菌株的影响各不相同,且同种杀虫剂对金龟子绿僵菌分生孢子萌发、菌落生长及产孢量的影响也不一样。在本研究中,低浓度杀虫剂对金龟子绿僵菌菌落生长或产孢具有促进作用,这可能是杀虫剂为绿僵菌的生长创造了有利的环境条件。因此,为获得真正对防治害虫有增效作用的菌药混配制剂,仍需进一步探讨其室内外的防治效果。
    参考文献:略


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作者:佚名
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